（考试时间：90分钟；分值：9 0分
一、选择题（本题 共45小题，每题 1分，共45分）
1．下列叙述符合基因工程概念的是( )
A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株
C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株
D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
2.下列关于限制酶的说法正确的是( )?
A.限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布?
B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列?
C.不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端?
D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键?
3．基因工程的操作步骤：①使目的基因与运载体相结合，②将目的基因导入受体细胞，③目的基因的检测和表达 ④提取目的基因。正确的操作顺序是（ ）
A．③②④① B．②④①③ C．④①②③ D．③④①②
4.在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（ ）
A．540个 B．8100个 C．17280个 D．7560个
5. EcoRⅠ和SmaⅠ限制酶识别的序列均由6个核苷酸组成，但切割后产生的结果不同，
其识别序列和切割位点(图中箭头处)如图所示，据图分析下列说法正确的是 ( )
EcoRⅠ SmaⅠ
A．所有限制酶的识别序列均由6个核苷酸组成
B．SmaⅠ切割后产生的是黏性末端
C．用DNA连接酶连接平末端和黏性末端的效率一样
D．细菌细胞内的限制酶可以切割外源DNA，防止外源DNA入侵 [来源:学+科+网Z+X+X+K]
6．基因工程的核心是( )。
A．目的基因的获取 B．基因表达载体的构建
C．将目的基因导入受体细胞 D．目的基因的检测与鉴定
7．右图为表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是( )
A．氨苄青霉素抗性基因
B．启动子
C．限制酶
D．DNA连接酶
8．基因治疗是指( )
A．把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的
B．对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的
C．运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞产生基因突变恢复正常
D．运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
9．科学家用纳米技术制造出一种“生物导弹”，可以携带DNA分子。把它注射入组织中，可以通过细胞的内吞作用的方式进入细胞内，DNA被释放出来，进入到细胞核内，最终整合到细胞染色体中，成为细胞基因组的一部分，DNA整合到细胞染色体中的过程，属于( )
A．基因突变 B．基因重组 C．基因互换 D．染色体变异
10．下面甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，下列说法中，错误的是（ ）
A．甲方法可建立该 细菌的基因组文库 B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库
C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D．乙方法需要逆转录酶参与
11.限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列是什么?( )[来源:学§科§网]
A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列为—AATT—
B.BamHⅠ和HindⅢ;末端互补序 列为—GATC—
C.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列为—AATT—
D.BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列为—GATC—
12．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图示判断下列操作正确的是（ ）
A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割
B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割
C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割
D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
13.下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，相应的酶依次是（ ）
A．DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B．限制酶、解旋酶、DNA连接酶
C．解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D．限制酶、DNA连接酶、解旋酶
14．如图为基因工程的部分操作过程示意图，甲～ 丁代表各不同阶段参与作用的成分。根据图示资料，下列叙述正确的是( )
A．细菌中的质粒都可以作为甲 B．丙是生物体内的RNA分子
C．乙和丁所用的酶相同 D．图中各个过程都可在试管内完成
15. 关于现代生物技术应用的叙述，错误的是( )
A．蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质
B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体
C．植物组织培养技术可用于植物茎尖脱毒
D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培育
16．下列不属于动物细胞工程应用的是 ( )
A．大规模生产干扰素．用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、杀虫剂等
D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖
17．下图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物紫草素，应分别选用编号是的（ ）
A．④② B．③② C．③④ D．④③
18．下列关于细胞工程的有关叙述，不正确的是 （ ）
A．利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄-马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术，而利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗得到多倍体植株没有采用植物组织培养技术
B．在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能会发生细胞脱分化，染色体变异或基因突变，而不可能发生细胞分化和基因重组
C．动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法，所用的技术手段，所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体
D．“试管婴儿”实质上就是“体外受精”和“胚胎移植”的“产物”，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇能得到自己的孩子；单克隆抗体的制备采用了动物细胞融合技术和动物细胞培养技术
19.运用动物细胞工程技术制备单克隆抗体的正确操作步骤是( )
①筛选杂交瘤细胞 ②制备特异性抗原 ③免疫动物 ④制备免疫的细胞和骨髓瘤细胞 ⑤能产生特定抗体的杂交瘤细胞 ⑥大量培养杂交瘤细胞 ⑦诱导细胞融合
⑧单克隆抗体的大量制备
A．②④③⑦⑤①⑥⑧ B．②③④⑦①⑤⑥⑧
C．④③⑦②⑤①⑧⑥ D．③④⑦①⑤⑧⑥②
20. 植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术或方法与原理不相符的是( )
A．植物组织培养和单克隆抗体——细胞的全能性
B．纤维素酶．果胶酶处理植物细胞壁——酶的专一性
C．原生质体融合和动物细胞融合——细胞膜的流动性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖
21．单克隆抗体是指（ ）
A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体
B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体
C．单个杂交瘤细胞增殖产生的高度纯一的抗体
D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体
22．下列关于利用细胞工程技术制备单克隆抗体的叙述，不正确的是( )。
A．给小鼠注射抗原，是为了获得能产生相应抗体的B细胞
B．B细胞与骨髓瘤细胞混合培养，是为了获得融合细胞
C．杂交瘤细胞进行体外培养，是为了获得单克隆抗体
D．杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎
23. 对于下面制备单克隆抗体过程示意图，不正确的叙述是( )[来源:学_科_网]
A．①表示B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均是从小鼠的脾脏中提取的
B．④中的筛选是通过抗原、抗体反应进行的
C．②促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导
D．⑤可以无限增殖
24 ．利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是
A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
25.美国得克萨斯州科学家在2002年2月14 日宣布，他们已经培育出世界上第一只克隆猫，这只名为CC的小猫猫色花白，看上去完全不像生养它的花斑猫妈妈，也不完全像为它提供细胞核的基因猫妈妈。可能正确的解释是( )
A．发生了基因重组所造成的结果 B.周围环境作用的结果
C．提供卵细胞的细胞质基因调控的结果 D.生养它的花斑猫妈妈基因调控的结果
26.“生物导弹”是免疫导向药物的形象称呼，它由单克隆抗体与药物、酶或放射性同位素配合而成，因带有单克隆抗体而能自动导向，在生物体内与特定目标细胞或组织结合，并由其携带的药物产生治疗作用。下列有关单克隆抗体和“生物导弹”的叙述，错误的是（ ）
A. 单克隆抗体是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体
B. 单克隆抗体不能与靶细胞内的抗原发生特异性结合
C. 用以治疗癌症的“生物导弹”就是以单克隆抗体作抗癌药物定向杀死癌细胞
D. “生物导弹”具有高度选择性，对异常细胞具有命中率高、杀伤力强的优点
27.下列生物技术与相应的实验 目的，配对不正确的是（ ）
A．胚胎分割移植——获得遗传特性相同的后代
B．植物组织培养——获得克隆植物
C．培养茎尖分生组织——获得抗病毒的植物苗
D．用适宜浓度的生长素浸泡插条基部——提高扦插枝条的成活率
28.下列关于细胞工程的叙述，错误的是 （ ）
A.电刺激可诱导 植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
29．有关全能性的叙述，不正确的是( ) A．受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高
B．生物体内细胞由于分化，全能性不能表达
C．卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高
D．植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性
30．人工种子是人们模仿天然种子结构制造出来的生命有机体，它能像天然种子一样萌发生长。人工种子的核心部分胚状体可以由悬浮培养的芽尖细胞得到，也可以通过试管培养的花粉或胚囊获得，由此人们把胚状体分为“体细胞胚”和“花粉胚”。请据此判断下列说法中不正确的是 ( )
A．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结籽困难、发芽率低等问题
B．培育胚状体利用了植物组织培养技术
C．同一种植物“体细胞胚”和“花粉胚”的染色体组的数目比为1∶1
D．该项技术的成功应用反映了细胞的全能性
31.下列四个选项中,没有采用植物组织培养技术的一项是( )。
A.花药的离体培养得到单倍体植株
B.秋水仙素处理萌发的种子或幼苗获得多倍体植株
C.基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株
D.细胞工程培育“番茄—马铃薯”杂种植株
32.从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌性和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是( )
A．合成编码目的肽的DNA片段
B．构建含目的肽DNA 片段的表达载体
C．依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽
D．筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
33．下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是 ( )
A．PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养能得到优良动物个体
B．使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型
C．在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性
D．用胰蛋白酶处 理动物组织后，可用无菌水稀释制成细胞悬浮液
34.科学家培育“荧光猪”的技术流程如图所示。字母表示有关技术或原理，正确的是（ ）
A.a农杆菌转化法 B.b体外受精
C.c有丝分裂与减数分裂 D.d胚胎移植
35.下列属于精子、卵子发生上的区别的是( )
A．细胞的分裂方式 B．卵子在卵巢内的储备
C．成熟细胞的染色体数量 D．细胞遗传物质的变化
36．受精过程的顺序为( )
①第一次卵裂开始 ②释放第二极体 ③顶体反应 ④穿越透明带
⑤雌、雄原核的形成 ⑥核膜消失，雌、雄原核融合
A．①②③④⑤⑥ B．③②④⑤⑥①
C．④⑤②①③⑥ D．③④②⑤⑥①
37．下列关于生物工程技术的有关叙述，不正确的是( )
A．哺乳动物体细胞核移植的成功率小于胚胎细胞核移植
B．为了提高胚胎移植的成功率，需要利用激素对受体进行超数排卵处理
C．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从胎儿的生殖腺细胞中分离获取
D．“试管婴儿”是“体外受精”、“胚胎移植”的“产物”，不能使不能产生精子或卵细胞的夫妇得到自己的孩子
38.供、受体母牛选择好后，要用激素进行同期发情处理的原因是（ ）
A、防止受体牛不愿意接受胚胎
B、只有受体与供体的生理状态相同，被移植的胚胎才能继续正常发育
C、只要发情排卵后，各阶段时间内的变化，供、受体生理状态完全相同
D、同期发情处理后，卵细胞和精子受精结合能力强
39．下列有关哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是( )
A．冲卵指的是从输卵管中冲出胚胎，而非冲出卵子
B．滋养层细胞发育成胎膜和胎盘是在囊胚期
C．所有动物胚胎移植的最佳时期都相同
D．胚胎移植实际上是生产胚胎的供体和孕育胚胎的受体共同繁殖后代的过程
40.下列有关说法错误的是（ ）
A．排卵是指卵子从卵泡中排出
B．胚胎移植中冲卵是指用特制装置把母畜子宫内的卵子冲洗出来
C．从卵巢采集的卵母细胞必须经培养后才能与精子体外受精
D．精子必须经过获能后才能与卵母细胞体内受精或体外受精
41.关于ES细胞的应用叙述错误的是（ ）
A．可以用于治疗由于细胞坏死，退化或功能异常引起的疾病
B．在体外诱导分化可培育出人造组织器官
C．是研究体外细胞分化的理想材料
D．不能用于治疗糖尿病、肝衰竭等疾病
4 2．胚胎移植成功率的高低取决于( ) A．供、受体生理环境的一致性 B．早期胚胎是否处于游离状态
C．胚胎移植是否存在免疫问题 D．胚胎和受体是否有联系
43．我国引进良种肉牛后，理论上使其快速繁殖的方法有( )
①组织培养 ②克隆 ③体外受精和胚胎移植 ④基因工程 ⑤胚胎分割
⑥体细胞杂交
A．①②⑥ B．②④⑥ C．②③⑤ D．①②⑤
44．下列有关生殖细胞的发生和受精过程的叙述错误的是( )
A．雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂
B．透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障
C．精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵
D．卵子是从动物的初情期开始，经过MⅠ和MⅡ两次连续分裂形成的
45.下列细胞中,哪一个代表已经完成受精的卵子?( )
二、非选择题(共55分)
1．以下是科学家采用不同方法培育良种牛的过程，a～h为操作过程，据图回答（12分）
（1）“试管牛”技术的操作流程是 （填字母）。
（2）图中数字标号代表的结构名称是：① ， ② 。
（3）图中用到的激素是 ，过程h常用的方法是 。
（4）完成a过程之前，要对精子进行 处理， 处理后的精子与卵子相遇时，首先发生 反应，受精时，防止多精子入卵的两道屏障是 和 。
（5）自然情况下，牛完成体内受精的场所是 ，胚胎分割时，一般选择
时期的胚胎，分割时要注意 。
2.下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。（20分）
(1)________技术是单克隆抗体技术的基础。
(2)在图中HAT培养基属于 培养基，只有融合的杂种细胞才能生长。动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用________。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最主要的优点是________________。
(4)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速________特点，又具备淋巴细胞的________特点，经过选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行__________和________，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(5)淋巴细胞是由动物体骨髓中的________细 胞分化、发育而来的。
(6)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其________性。
3.科学家培育荧光鼠的设计思路可用下面的图解表示。据图回答下列问题(10分)
(1)科学家在过程A中对天然质粒做的修饰改造是________。B过程用到的工具酶有______________ 。
(2)E过程为体外受精，卵子的状态应达到________期才能与获能后的精子完成受精。G过程应用的技术称为________，此时的胚胎应发育到 时期。
(3)检测荧光小鼠细胞内是否含有基因X，常用的技术手段是______________________；判断转基因荧光鼠荧光基因的表达是否成功，在个体水平上应检测__________________________________。
(4)如果想一次繁殖多只转基因鼠，则需要在过程G中实施____________，胚胎移植时应选择 的 的受体。
4.请回答有关下图的问题（13分）
(1)图甲中①～⑤所示的生物工程为________________。该工程通过对__________的修饰或合成，对现有的________进行改造，或制造出一种新的蛋白质，以满足人类生产生活的需求。
(2)图甲中序号④所示过程叫做________________，需要用到的酶是 。
(3)如图乙，一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，在基因尾端还必须有[2]________；图中[3]________的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
(4)若预期蛋白质欲通过乳腺生物反应器生产，则构建基因表达载体时，图乙中序号[1]代表的是________；且在图甲中⑨过程之前，要对精子进行筛选，保留含性染色体________的精子。
(5)为获得较多的受精卵进行研究，图甲中⑥过程一般用 激素对供体做________处理；为提高培育成功率，进行⑩过程之前，要对________动物做________处理，以使其达到相同的生理状态。
参考答案
一、选择题（45分，每题1分）
1----10 BBCBD BBABC
11—20 DDCDB CBCBA
21—30 CDADC CCDCC
31—40 BCBDB ABBDB
41—45 DACDC
二、非选择题
（3）促性腺激素 显微注射法
（4）获能 顶体 透明带反应 卵细胞膜反应
（5）输卵管 桑椹胚或囊胚 将内细胞团均等分割
2(20分，每空2分)答案：(1)动物细胞培养 (2)选择 灭活的病毒 (3)特异性强，灵敏度高，并可大量制备(4)在体外大量增殖 分泌专一抗体 克隆化培养 抗体检测 (5) 造血干 (6)特异性
3（10分，每空1分）(1)添加终止子 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 (2)减数第二次分裂中(MⅡ) 胚胎移植 桑椹胚或囊胚 (3)DNA分子杂交技术 小鼠身体是否有荧光 (4)胚胎分割 同种 生理状态相同
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