一、探究温度对酶活性的影响:
1、实验目的:
(1)初步学会探索温度和pH对酶活性的影响的方法。
(2)探索淀粉酶在不同温度和pH下催化淀粉水解的情况。
2、实验原理:
(1)淀粉遇碘后,形成紫蓝色的复合物。
(2)淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖和葡萄糖(淀粉水解过程中,不同阶段的中间产物遇碘后,会呈现红褐色或红棕色。)麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色。
注:市售a-淀粉酶的最适温度约60℃
3、方法步骤:
序号 | 加入试剂或处理方法 | 试管 | |||||
A | B | C | a | b | c | ||
1 | 可溶性淀粉溶液 | 2mL | 2mL | 2mL | / | / | / |
新鲜淀粉酶溶液 | / | / | / | 1mL | 1mL | 1mL | |
2 | 保温5min | 60℃ | 100℃ | 0℃ | 60℃ | 100℃ | 0℃ |
3 | 将a液加入到A试管, | ||||||
4 | 保温5min | ||||||
5 | 滴入碘液,摇匀 | 60℃ | 100℃ | 0℃ | |||
6 | 观察现象并记录 |
二、不同pH值对酶活性的影响(原理、目的参照温度的相关内容)
1、实验步骤:
序号 | 加入试剂或处理方法 | 试管 | ||
1 | 2 | 3 | ||
1 | 注入新鲜的淀粉酶溶液 | 1mL | 1mL | 1mL |
2 | 注入蒸馏水 | 1mL | / | / |
3 | 注入氢氧化钠溶液 | / | 1mL | / |
4 | 注入盐酸 | / | / | 1mL |
5 | 注入可溶性淀粉溶液 | 2mL | 2mL | 2mL |
6 | 60℃水浴保温5min | |||
7 | 加入斐林试剂,边加边振荡 | 2mL | 2mL | 2mL |
8 | 水浴加热煮沸1min | |||
9 | 观察3支试管中溶液颜色变化边记录 |
易错点拨:
1、在酶的最适pH探究实验中,操作时必须先将酶置于不同环境条件下(加清水、加氢氧化钠、加盐酸),然后再加入反应物。不能把酶加入反应物在酶的作用下先发生水解。
2、在酶的最适温度探究实验中,酶溶液和反应物混合之前,需要把两者先分别放在各自所需温度下保温一段时间。若选择淀粉和淀粉酶来探究酶的最适温度,检测的试剂宜先用碘液,不应该选用斐林试剂。因选用斐林试剂需热水浴加热,而该实验中需严格控制温度。
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