原理
植物色素包括脂溶性的叶绿体色素和水溶性的细胞液色素,前者存在于叶绿体,与光合作用有关,如叶绿素;后者存在于液泡中,特别与花朵的颜色有关,如花青素属黄酮类物质。了解它们的性质有助于对其生理功能的理解。
仪器药品
分光计 天平
研钵 分液漏斗
移液管 量筒
吸球 试管
碳酸钙 氢氧化钾
丙酮 乙醚
甲醇 盐酸
醋酸铜
操作步骤
1.叶绿体色素的提取
取菠菜(或其他植物)叶子2g,放在研钵中,加石英砂和碳酸钙少许,丙酮约5ml,研磨成匀浆,再加丙酮15ml,则得深绿色提取液,用漏斗过滤之,即为色素提取液。
2.叶绿素的荧光现象
取上述色素丙酮提取液少许于试管中,用反射光和透射光,观察提取液的颜色有无不同,反射光观察到的溶液颜色,即为叶绿素产生的荧光颜色。
3.光对叶绿素的破坏作用
取上述色素丙酮提取液少许,分装在2支试管中,1支试管放在黑暗处(或用黑纸包裹),另1支试管放在强光下(太阳光),经2─3小时后,观察两支试管中溶液的颜色有何不同?
4.铜在叶绿素分子中的替代作用
取上述色素丙酮提取液少许于试管中,1滴1滴加入浓盐酸,直至溶液出现褐绿色,此时叶绿素分子已遭破坏,形成去镁叶绿素。然后加醋酸铜晶体1小块,慢慢加热溶液,则又产生鲜亮的绿色。此即表明铜已在叶绿素分子中替代了原来镁的位置。
5.黄色素和绿色素的分离
取上述色素丙酮提取液10ml,加到盛有20ml乙醚的分液漏斗中,摇动分液漏斗,并沿漏斗边缘加入30ml蒸馏水,轻轻摇动分液漏斗,静置片刻,溶液即分为两层。色素已全部转入上层乙醚中,弃去下层丙酮和水,再用蒸馏水冲洗乙醚溶液1─2次。然后于色素乙醚溶液中加入5ml30%KOH甲醇溶液,用力摇动分液漏斗,静置约10分钟,再加蒸馏水约10ml,摇动后静置分离,则得到黄色素层和绿色素层,分别保存于试管中。
6.观察色素溶液的吸收光谱。
(1) 调节分光计,观察电灯光的光谱。
(2) 观察色素丙酮提取液,用丙酮将溶液稀释1倍比较之。
(3) 观察黄色素乙醚溶液,用乙醚将溶液稀释1倍比较之。
(4) 观察皂化叶绿素甲醇溶液,用甲醇将溶液稀释1倍比较之。
(5) 观察被光破坏的色素丙酮溶液,试与(2)作比较。
(6) 观察被铜取代了镁的色素溶液。
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